BioRun Fast Site-Mutation Kit
产品描述
BioRun Fast site-mutation Kit是一款适用于基因快速定点突变的试剂盒套装，可以一步实现目标基因1-5个不连续位点的同时突变。本试剂盒是基于BioRun Seamless同源重组的单/多位点定点突变系统，包含2×BioRun Pfu Super Mix、BioRun DpnI和Assemble重组试剂。BioRun Fast site-mutation Kit极大的简化了多位点突变的连续PCR过程，并且具有良好的稳定性和可重复性，能让你快速、便利的完成定点突变实验。
产品特点
1、2×BioRun Pfu Super Mix精准地复制目标基因和载体片段；
2、基于同源重组原理，设计基因突变时不需要考虑酶切位点的影响；
3、BioRun DpnI快速、高效的降解本底质粒，最大程度降低了野生型基因残留；
4、1～5个不连续位点一次性突变，方便又迅速；
5、试剂盒提供了定点突变需要的所有酶试剂，无需额外购买酶等试剂；
6、适用范围：酶蛋白定点突变，酶蛋白结构域重组，DNA单/多碱基突变。
定点突变引物设计工具：http://www.biorun.com/tools/108.html
产品组分
应用实例
T189M突变体构建
靶标蛋白ProI基因全长约2600bp，重组在pET-30a载体上，将其189号氨基酸Thr突变为Met，主要实验过程如下：
1、使用2×BioPfu Super Mix扩增pET-30a_ProI重组载体（全长7.8kb），PCR产物经0.5μL BioRun DpnI消化l0min，2h完成。
2、电泳检测PCR产物，条带单一且清晰明亮，取大约50ng PCR产物，加入2×BioRun Assemble Mix进行连接反应，50℃孵育15min，30min完成。
3、取5μL连接产物转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞，1.5h完成（含无抗孵育lh）。
4、过夜培养，次日挑取3个克隆子进行菌体PCR验证，全部为阳性克隆。
5、对克隆子1进行测序，结果如下：
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