Q5 DNA Polymerase
产品货号:#RAC02
产品规格:500 units
产品说明
Q5 DNA Polymerase,其来源于高保真DNA聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有超保真性能(~280倍Taq)、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力,使用该酶可轻松扩增20kb的基因组DNA、40kb的λDNA、10kb的cDNA。该酶具有6kb/min以上的延伸速度。该酶具有5’-3’的聚合酶活性、强3’-5’的外切酶活性,产物为平末端。
产品组分
名称 | 规格 |
Q5 DNA Polymerase | 500U |
主要特征
1、超保真扩增:~280倍Taq的保真性能,是载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成的最佳用酶。
2、快速扩增:具6kb/min 的扩增能力。
3、长片段扩增:质粒、λDNA等简单模板可以有效扩增>40 kb,基因组可以有效扩增>20 kb,cDNA可以有效扩增>10kb。
产品储存
-20℃可保存2年。
使用方法
1. 按下表配制反应体系并混合均匀:
Q5 DNA Polymerase | 0.0625μl |
dNTP Mixture (25 mM each) | 0.1μl |
10X BioRun Q5 Buffer | 2.5μl |
上游引物(10μM) | 1μl |
下游引物(10μM) | 1μl |
模板 DNA | 1-250 ng |
ddH2O | up to 25μl |
2. PCR扩增循环参数
循环数 | 温度 | 时间 |
1st Cycle | 95°C | 5min |
25-35 Cycles | 95°C | 30s |
50~60°C | 30s | |
72°C | 6kb/min | |
Last Cycle | 72°C | 2min |
3. 电泳
1%琼脂糖凝胶电泳,上样5μl,电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项
当扩增片段<1kb时,延伸时间可直接使用15s,当扩增片段>5kb时,按照2-3kb/min的延伸时间进行设置,能获得更高的产量。
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