2×BioRun Pfu PCR Mix
产品名称：2×BioRun Pfu PCR Mix
产品货号：#RAC00
产品规格：5mL/包
产品说明
描述：Pfu DNA聚合酶，其来源于高保真DNA聚合酶，并加入了增强的延伸结构，使其具有超保真性能（~128 倍 Taq）、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力，使用 该酶可轻松扩增 20kb 的基因组 DNA、40kb 的λDNA、10kb 的 cDNA。该酶具有 2kb/min 以上的延伸速度。2×BioRun Pfu PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、强 3’-5’的外切酶活性，产物为平末端。
特点和用途 :
(1) 超保真扩增：~280 倍 Taq 的保真性能，是载体构建、点 突变、NGS 模板扩增、基因合成的最佳用酶。
(2) 快速扩增：30 sec/kb 可高效扩增绝大多数片段。
(3) 长片段扩增：质粒、λDNA 等简单模板有效扩增长度可达 40 kb， cDNA 有效扩增长度可达 10 kb，基因组有效扩增长度可达 20 kb。
储存：长期储存置于-20°C 以下，可保存 1 年；短期使用置 于 4°C（3 个月）保存。
1. 按下表配制反应体系并混合均匀：
2×BioRun Pfu PCR Mix | 12.5μl |
上游引物(10μM) | 1μl |
下游引物(10μM) | 1μl |
模板 DNA | 1-250 ng |
ddH2O | up to 25μl |
2. PCR 扩增循环参数
循环数 | 温度 | 时间 |
1st Cycle | 95°C | 5min |
25-35 Cycles | 95°C | 30s |
50~60°C | 30s | |
72°C | 2kb/min | |
Last Cycle | 72°C | 2min |
3. 电泳
1% 琼脂糖凝胶电泳，上样5μl，电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项
当扩增片段<1kb 时，延伸时间可直接使用 30s，当扩增片段>5kb 时，按照1kb/min 的延伸时间进行设置，能获得更高的产量。
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